Архив рубрики «Основное»

Гибридомная пчния

Поскольку большинство белков, упоминаемых в литературе, имеют значения pl8 Righetti et al.1981, анионообменники применяют более широко, чем катионообменники Gupta et al.1983. Как и в других случаях, при разделении крупных белков критическим фактором является размер пор ионообменника. Показано, что анионообменники с размером пор до 4000 А применимы для хроматографии белков, имеющих мол. массу 200 000-400 000 Regnier, 1983. Раньше отдавали предпочтение слабым ионообменникам, но теперь показано, что сильный анионообменник Mono Q зарегистрированная торговая марка фирмы Pharmacia и сильный катионообменник Mono S зарегистрированная торговая марка фирмы Pharmacia обладают рядом преимуществ. Они характеризуются более высокой разрешающей способностью, более легко прогнозируемым временем задержки веществ и лучшим выходом белков, чем использовавшиеся ранее матрицы на основе силикагеля Kopaciewicz, Regnier, 1983. Эти новые анионообменники созданы на основе гидрофильной полиэфирной смолы Richey, 1982 имеют дополнительное преимущество они устойчивы в широком диапазоне рН 2-12. Силика- гельные матрицы используются только при рН 8, при больших значениях рН силикагель растворим. Хотя при обратнофазовой в обращенных фазах ВЖХ белков необходимо использование денатурирующих растворов с низким рН и органических растворителей в высоких концентрациях, она приобрела в последние годы большую популярность. Основные достижения в этой области рассмотрены в специальных обзорах Alvarez et al.1981; Regnier, 1983.

Правда, что пеноизолом можно утеплять стены дома снаружи и изнутри? Кто-нибудь так делал?

Проблема оптимизации эпиднадзора

Определялась четко выраженная лабильность пульса и уровня артериального давления. Характерными были также вегетативные расстройства потливость, чувство приливов, парестезии, похолодание рук и ног, головокружение. Патологические изменения в желудочно-кишечном тракте являются ведущими при иерсиниозе. При развитии гастро- интестинальной формы иерсиниоза наиболее часто поражение желудочно-кишечного тракта протекает в виде гастроэнтерита, а гастроэнтероколит развивается значительно реже. Имеют место симптомы интоксикации разной степени выраженности. Начало заболевания, как правило, острое, сопровождается болями в животе, тошнотой, повторной рвотой и жидким стулом. Одновременно присоединяются симптомы интоксикации озноб, повышение температуры, головная боль, головокружение, слабость, боли в костях и мышцах. Жидкий стул наблюдается у 91 больных. По данным JI. E. Бродова и соавт. 1989 у большинства больных частота стула достигала 10 раз в стуки. У 7 больных стул был настолько частым, что приводил к развитию обезвоживания 2-й степени. По данным Г. Н. Кареткиной и соавт. 1986 тошнота имела место в 88 случаев, рвота чаще всего многократная — в 69. При развитии абдоминальных форм иерсиниоза поражения желудочно-кишечного тракта проявляются в виде острого аппендицита, мезентериального лимфаденита, терминального илеита. У взрослых больных Г. Н. Кареткина и др.

Самая прекрасная цифровая фоторамка как правило инкрустирована кристаллами Сваровски.

«тонические проявления псе вдотубер кулеза

«тонические проявления псе вдотубер кулезаАвцын, А. А. Жаворонков 1980, Т. И. Дмитровская, Дмитровский A. M. 1982, Н. Д. Ющук, Г. Н. Кареткина 1987. Мы сочли возможным дать описание клинических проявлений иерсиниоза по органам и системам. Поражение кожных покровов. Экзантема, по нашим данным, наблюдается у 90 больных генерализованными формами иерсиниозов. Характерным является гиперемия лица и шеи, конъюнктивит, инъекция сосудов склер, энантема на слизистой оболочке мягкого неба. Чаще всего сыпь бывает мелкоточечной, реже пятнистой, или петехиальной, зачастую в виде узловатой эритемы. Обычно экзантема появляется в первые дни заболевания, реже на второй неделе. Сыпь располагается на груди, животе, спине, конечностях, ее типичная локализация — на ладонях и подошвах, с чувством жжения и распирания подошв и ладоней, отечностью и описывается рядом авторов как симптом перчаток и носков. Продолжительность высыпаний составляет в среднем 1-4 дня, однако возможны подсыпания. После сыпи нередко появляются шелушения в местах локализации сыпи, обычно на 12-15 день болезни.

Не забивайте себе голову ерундой про первый поцелуй — всё получится само собой.

В от/пчие от псе вдотубер кулеза

Применяют доксициклин взрослым и детям старше 8 лет. По данным Н. Д. Ющука и соавт. 1989, Д. А. Валишина 1990, у больных с генерализованной формой иерсиниоза положительный клинический эффект при лечении доксицик- лином был получен в 71,9 случаев. Одновременно исследователями было установлено, что использование доксициклина в ранние до 5-7-го дня сроки болезни оказывало положительное влияние, способствуя более быстрому исчезновению клинических проявлений болезни, уменьшению частоты обострений, рецидивов и остаточных явлений. При назначении препарата в поздние после 7-го дня болезни сроки лечебный эффект был неполным. Тетрациклин значительно уступает по эффективости док- сициклину, однако при невозможности по какой-либо причине назначить один из вышеперечисленных препаратов тетрациклин может быть использован для лечения больных иерси- ниозами. Группа левомицетина. Хлорамфеникол левомицетин в настоящее время может быть рекомендован преимущественно для лечения иерсиниозного менингита. В этих случаях левомицетина сукцинат назначают внутримышечно в дозе 70- 100 мгкг массы тела в сутки в течение 10-12 дней. Аминогликозиды. Для парентерального применения достаточно эффективными остаются аминогликозиды, в частности гентамицин, являющийся аминогликозидом II поколения. Для лечения иерсиниоза гентамицин назначают в дозе 80 мг 2 раза в сутки. Продолжительность курса лечения — 7 дней. Однако гентамицин, как и другие аминогликозиды, является потенциально токсичным антибиотиком. Цефалоспорины. Наблюдения последних лет свидетельствуют об эффективности цефалоспоринов III поколения Яковлев С. В.

На сайте artdesant.com масса статей о работе в фотошоп. Это блог о фотошопе для новичков — для тех, кто делает первые шаги в фотографии и дизайне.

Культуральная жидкость гибридов

1982b, 1984. Опыты по клонированию в космидах и опыты типа прогулка вдоль хромосомы использовались также для характеристики районов хромосомы, содержащих гены класса I, у мышей линии C57BL10 Weiss et al.1984. К тому же данный подход применим для характеристики МНС, кодирующего гены класса III как у мыши, так и у человека Chaplin et al.1983; Carroll et al.1984; Steinmetz et al.1984. Таким образом, в настоящее время МНС является наиболее детально исследованным участком хромосом млекопитающих. В этой главе мы подробно опишем методы, используемые нами в настоящее время для конструирования и скрининга космидных библиотек, а также для опытов типа прогулка вдоль хромосомы. Прогулка вдоль хромосомы определяется как метод, используемый для выделения фрагментов ДНК, соседних с данным районом клонированной ДНК. В большинстве случаев такая прогулка осуществляется с помощью скрининга геномных библиотек, полученных из частично гидролизованной ДНК, с использованием меченого уникального рестрикционного фрагмента, выделенного из концевой области клонированного района. Таким образом получают клоны, содержащие перекрывающиеся фрагменты ДНК, и после рестрикционного картирования и соответствующей ориентации фрагментов материал этих клонов может использоваться для продолжения такой прогулки. Маркерные фрагменты бактериофага Я.

ремонтируем с умом

На плазмиде Y. enterocolitica

,1984, Малишевская Т. В. и соавт. ,1974, Буланьков Ю. И. ,1992 и др.можно выделить следующие, наиболее часто приводимые в качестве основных, признаки, характерные для ОАПЭ. Вместе с тем, в литературе достаточно часто встречаются сообщения о диагностике псевдотуберкулезного процесса у больных без типичных для этого заболевания симптомов Самсонов В. А.1977; Яремчук А. Я. Дойда А. И. ,1984; Zweig A. Et all, 1977; Paff J. R. et all, 1976; Ponte M. C. et all, 1978; Dykes E. H. et all, 1987 и др. В таких, как правило, единичных случаях заболевания, установление этиологии болезни было обусловлено либо необычными операционными находками, либо характерными для псевдотуберкулезной инфекции изменениями, обнаруженными при гистологическом исследовании.

дешёвые домены

Успехи

Если общий объем составляет 10 мл, то ДНК осаждают в полиалломерной пробирке ротора SW27. Чтобы пробирка не разрушилась при центрифугировании, ее заполняют доверху 70-ным этанолом. Длительность центрифу- Представленная ниже пропись относится к космидному вектору pNNL Brosveld et al.1982, содержащему ген Eco-gpt, облегчающий перенос клонированных генов в эукариотические клетки. Эту пропись с соответствующими модификациями можно применить и в случае других космидных векторов. Одну аликвоту ДНК вектора pNNL 20 мкг гидролизуют рестрикта- зой Нра, а другую такую же — рестриктазой Clal. Добавляют по 20 ед. каждого фермента инкубируют 4 ч при 37 С. Реакцию останавливают, помещая пробы в лед, и проверяют полноту гидролиза гель-электрофорезом в мини-геле 0,6-ной агаро- зы. Если гидролиз прошел полностью, к каждому из гидролиза- тов добавляют равный объем фенола, объединяют пробы в одной пробирке и проводят экстракцию. Затем их экстрагируют севагом, добавляют 110 объема 3 М ацетата натрия, рН 5,2, и осаждают этанолом. Осадок промывают 70-ным этанолом и высушивают в концентраторе Speed Vac Savant. ДНК вновь растворяют в 50 мкл 10 мМ трис-HCl, рН 8,0, и удаляют концевые 5-фосфатные группы с помощью фосфата- зы из кишечника теленка ФКТ Maniatis et al.1982. В пробу с конечным объемом 100 мкл добавляют 0,75 ед. ФКТ Boeh- ringer инкубируют ее при 37 С 30 мин.

Что такое форекс онлайн в Интернете.

Приведенный здесь метод

Недвижимость в Брянской области

Очистка с помощью преципитации Как отмечено выше, сульфат аммония можно добавлять непосредственно к культур альной жидкости до достижения 50-ного насыщения 29,1 г на 100 мл. Раствор выдерживают на холоду 1-2 дня до тех пор, пока не сформируется видимый осадок. Преципитированный материал осаждают центрифугированием 30 мин при 2000 g при 10 С и растворяют в 110 исходного объема ЗФР. Затем к полученному раствору добавляют равный объем НСА и минимум в течение ночи выдерживают смесь на холоду для формирования осадка. Еще раз повторяют всю процедуру переосаждения. Полученный в результате финальный осадок растворяют в 1 мл ЗФР и диализуют сначала против ЗФР, а потом в течение ночи против трех смен буфера с низкой ионной силой. Диализ удобно проводить в простом устройстве, которое описали Полит и соавторы Pohlit -et al.1979. Это устройство дает возможность проводить одновременный диализ многих образцов и легко получать после диализа радиоактивный материал. Образовавшийся в буфере с низкой ионной силой преципитат осаждают центрифугированием, но супернатант, который иногда содержит большую часть антител, не выливают, а сохраняют. К осадку добавляют 1 мл ЗФР и ту часть его, которая переходит в раствор, используют как очищенный препарат антител; нерастворившуюся часть осадка отбрасывают. Очищенный препарат антител и супернатант в буфере с низкой ионной силой хранят при 4С после добавления азида натрия и БСА, как описано выше. Эффективность преципитации буфером с низкой ионной силой, к сожалению, варьирует в значительной степени. Для многих IgM формируются осадки, содержащие почти всю активность антител. Из этих осадков получают препараты антител, дающие удовлетворительные результаты в тестах связывания табл. 12-1, правда, не такие хорошие, как в случае IgG.

здесь на сайте Настольные сады найдешь

Для каждого этапа конденсации

Для получения реплик Hanahan, Meselson, 1983 основной фильтр вынимают из чашки, захватив его пинцетом Millipore с плоскими браншами за два угла, находящиеся по диагонали друг от друга, и кладут на стерильный лист бумаги Whatman 3 ММ колониями вверх. Фильтр из набора для получения реплик кладут на исходный фильтр таким образом, чтобы сторона, которая будет находиться в контакте с агаром, была обращена вверх. Это делают очень осторожно, удерживая накладываемый фильтр за два угла пинцетом Millipore. После того как фильтр для получения реплики пришел в контакт с исходным фильтром, их нельзя сдвигать относительно друг друга. Полученный сэндвич накрывают стерильной бумагой Whatman 3 ММ и сдавливают большой пластмассовой коробкой с плоским дном. Верхнюю бумагу Whatman 3 ММ выбрасывают иглой для шприца 20 GIV2, содержащей тушь, маркируют фильтры, делая в них 10 отверстий 3 внизу, 3 в середине, 3 вверху и одно в левом верхнем углу. Фильтры осторожно отделяют друг от друга и опять помещают в чашки с агаром L-амп колониями вверх. Фильтр, использованный для получения реплики, кладут в свою чашку, в то время как исходный фильтр помещают в чашку со свежим агаром L-амп. Исходный фильтр инкубируют 1-2 ч при 37 С, после чего аналогичным образом получают вторую реплику. Маркирование отверстия исходного фильтра переносят на вторую реплику с помощью иглы. После получения второй реплики исходный фильтр помещают в чашку со средой HMF-1 амп. С каждого исходного фильтра необходимо получить по три реплики. Третий набор фильтров с репликами инкубируют в чашках со средой HMF-1 амп. Наконец, четвертый фильтр с репликой используют фильтры, смоченные в чашках со средой HMF-1 амп готовят для каждого из исходных фильтров. Два последние фильтра, однако, не отделяют друг от друга, а замораживают в виде сэндвича Hanahan, Meselson, 1983. Сэндвич, обернутый листами бумаги Whatman 3 ММ, смоченными водой, кладут в полиэтиленовый мешочек, который заплавляют и замораживают при -70 С. Три фильтра-реплики, полученные от каждого исходного фильтра два набора на агаре L-амп, один на агаре HMF-1 амп, подращивают при 37С до тех пор, пока диаметр колоний не станет равным 1 мм.

Нашел статью про баню тут http://13stroy.ru/publ

А. Принцип метода

Инжектор высокого давления должен быть также удобным в работе. Накопленный в нашей лаборатории опыт позволяет заключить, что для разделения белков с помощью ВЖХ наиболее подходящим является инжектор с петлей на 2 мл. Инжектор позволяет вводить в петлю любой объем образца вплоть до 2 мл. При повороте клапана инжектора петля подсоединяется таким образом, что на колонку первой подается последняя введенная в петлю порция образца. Это сводит к минимуму размазывание полосы материала, что особенно важно для ГП-ВЖХ. Для разделения белков пригодны многие наполнители колонок, но лучше всего для этих целей использовать крупнопористые матрицы, для которых характерно низкое неспецифическое связывание белков. В состав большинства систем ВЖХ входят предварительные колонки, предохраняющие от порчи более крупные и дорогостоящие разделяющие колонки. Для предварительных колонок часто используют тот же наполнитель, что и для основных. В случае ОФ-ВЖХ разделения проводили и просто на одних предварительных колонках Bhown, Bennett, 1984. Для белков большинство детекторов регистрирует поглощение УФ-света или флуоресценцию. Имеются разнообразные ультрафиолетовые детекторы, работающие в сканирующем режиме, а также детекторы с изменяемой или фиксированной длиной волны. Коллектор фракций для ВЖХ должен работать достаточно быстро, чтобы успевать за высокой скоростью элюции; имеется много типов пригодных для этих целей коллекторов фракций. В нашей лаборатории методы ВЖХ используют для очистки изучения структуры и функции иммуноглобулинов. Ниже приведены детальные описания применяемых вариантов ВЖХ и примеры их использования. ГП-ВЖХ применяют для разделения легких и тяжелых цепей антител после восстановления и ал- килирования. Этот метод используют также для очистки фрагментов антител после их химического расщепления.

Снять сегодня дворец для cвадьбы — это не такая уж и сложность — были бы деньги и желание