Разработка эффективной схемы

При нагревании над открытым пламенем раствор агара можно приготовить быстрее, однако это следует делать осторожно, непрерывно вращая сосуд с раствором, чтобы агар расплавлялся полностью доводить до кипения трижды, а потери материала из-за выкипания были минимальными. В обоих случаях рекомендуется использовать склянки с неплотно закрытыми крышками. Как показали Кинкейд и др. Kincade et al.1976, в агаре присутствуют митогены, необходимые для пролиферации В-клеток в полужидкой среде. Другие полужидкие среды на основе метилцеллюлозы или агарозы проявляют митогенный эффект только при добавлении к ним экстракта агара. Мы не нашли больших отличий в способности разных партий агара поддерживать рост колоний В-клеток или колоний, возникающих из предшественников В-клеток, но обнаружили зависящие от партии агара небольшие вариации в консистенции образующегося агарового геля. Это несущественно для выявления колоний с помощью стереомикроскопа, но может создавать большие неудобства при переносе агарового геля на предметное стекло — процедуре, необходимой в ходе анализа секреции антител колониями В-клеток Paige, Skar- vall, 1982. Поскольку митогенные свойства агара определяются концентрацией полианионных полисахаридов, а консистенция геля зависит от содержания несульфатированной 3,6-анги- дро-галактозы, неудивительно, что эти параметры могут варьировать независимо. В нашей практике мы столкнулись с тем, что из четырех партий агара одна оказалась непригодной для опытов с переносом геля на предметные стекла. Для достижения конечного результата — получения полужидкого геля из 0,3-ного агара, содержащего известное число диспергированных в нем клеток, — могут быть использованы различные способы. Выбор конкретного способа зависит как от замысла и масштабности опыта, так и от технических возможностей экспериментатора. Обычно среду разливают аликвотами по 10-50 мл и оставляют их при 37 С в водяной бане. Расплавленный агар добавляют до конечного разведения 1 10. После смешивания среды и агара добавляют клетки, суспензию перемешивают и разливают по пластиковым чашкам Петри диаметр 35 мм, содержащим нижний слой агара. Если готовят 50 чашек, содержащих идентичный верхний слой агара, то удобнее всего добавить необходимое число клеток к 50 мл содержащей агар среды, перемешать суспензию и разлить ее по чашкам.

Уже просто не хватает фантазии писать анкоры по ключевому слову продвижение сайтов. Надо пойти заказать у копирайтера.

Оставить комментарий