Схемы очистки

через 2 схемы очистки тот иВпоследствии были разработаны варианты анализа, позволяющие обнаруживать предшественники эритроцитов Stephenson et al.1971; Axelrad et al.1974, предшественники мегакариоцитов Metcalf et al.1975a, а также предшественники с менее ограниченным потенциалом, способные дифференцироваться при росте в полужидкой среде по нескольким направлениям Johnson, Metcalf, 1977. Сходные методы использовали также и для разработки анализа клонального роста В-клеток Metcalf et al.1975 b, 1976; Kincade et al.1976. Описаны методы клонирования В-клеток в жидкой среде с помощью лимитирующего разведения суспензии или микроманипулирования с клетками, а также на фрагментах селезенки Klinman, 1972; Quintans, Lefkovits, 1974; Andersson et al.1977; Wetzel, Kettman, 1981. Применение этих методов для обнаружения и подсчета предшественников В-клеток встречало большие трудности, прежде всего в силу малочисленности соответствующих лимфоцитов в большинстве популяций. Несмотря на это, клональную диф- ференцировку В-клеток удалось проследить при использовании как лимитирующего разведения и культивирования клеток на фрагментах селезенки, так и полужидких агаровых культур Melchers, 1977 a, b; Klinman et al.1980; Paige, 1983, 1984; Paige et at.1984; Jyonouchi, Kincade, 1983. В этой главе мы рассмотрим применение полужидких агаровых культур для изучения дифференцировки В-лимфоцитов. Система, которую мы использовали, позволяет обнаружить предшественники, которые присутствуют в печени 12-суточного плода, и обеспечивает возможность клональной дифференцировки этих клеток в колонии, содержащие В-лимфоциты, секретирующие антитела. Будет описан также способ обнаружения секретируемых антител либо с помощью локального гемолиза, либо посредством переноса продукта секреции на нитроцеллюлозные фильтры с последующей иммуноидентификацией.

Позитивний блог megafriends.org.ua

Оставить комментарий