Оа2-Молекулы

Однако эти концентрации G-418 находятся на уровне порога прорыва чувствительности. Для того чтобы убедиться в передаче генов, необходимо провести простой тест биологический тест или опыты типа дот-блот ДНК с использованием pBR-322 в качестве зонда Kafatos et al.1979; Collins, Grondine, 1983; это необходимо для того, чтобы подтвердить наличие стабильной трансформации.Трансформанты должны поддерживаться в селектирующих условиях. Метод слияния с протопластами бактерий часто обеспечивает наследование множественных копий гена, переданного с помощью трансфекции 10-50 копий на геном McCub- геу et al.1985. Если такие клоны выращивать в неселекти- рующих условиях, то примерно четверть всех субклонов, которые вначале имели по 50 копий гена, потеряют все эти копии в пределах двух месяцев культивирования McCubrey, неопубликованные результаты. Напротив, клоны, содержащие лишь немногочисленные копии генов 1-5, являются относительно стабильными, и они не теряют ген даже при выращивании в течение 6 мес в неселектирующих условиях. Если исследователь заинтересован в анализе РНК, образуемой трансформантами, содержащими вектор с последовательностями плазмиды pBR322, не следует пользоваться зондами, которые содержат pBR322. Многие трансформанты образуют РНК, которая содержит последовательности плазмиды pBR322, и в результате могут быть получены ошибочные данные. Недавно было описано много новых методов для получения стабильного переноса генов использование векторов на основе ретровирусов Shimotohno, Temin, 1981, слияние с липосомами Schaefer-Ridder et al.1982, слияние с мембранами эритроцитов Wiberg et al.1983, метод мембранного укола Yamamoto et al.

Посмотреть венесуэла туры тут.

Оставить комментарий