После хроматографии и высушивания пластину подвергают действию паров иода в течение 5 мин. При этой обработке все нейтральные липиды, фосфолипиды и гликолипиды окрашиваются в цвета от желтого до темно-коричневого. Приобретаемая окраска нестабильна. Хроматограмму можно также опрыскать под тягой реагентом А, высушить и опрыскать реагентом Б. При нагревании хроматограммы при 100 С в течение 5 мин развивается окраска от розовой до пурпурной. Этот метод окрашивания весьма чувствителен; при его использовании выявляются все углеводы. Ганглизоиды, содержащие сиа- ловую кислоту, окрашиваются в голубой цвет, после того как опрысканную реагентом В хроматограмму выдерживают 5 мин при 110С. При нагревании хроматограмму следует накрыть стеклянной пластиной, для того чтобы соляная кислота не испарилась полностью. Нейтральные гликолипиды окрашиваются этим реагентом в светло-серый цвет. Описанный в разд. IV твердофазный РИА является очень чувствительной и удобной методикой определения липидных антигенов. Как уже было отмечено, некоторые антитела в условиях, при которых проводят эксперимент, имеют тенденцию к неспецифическому связыванию с твердофазным носителем, поэтому при первичных тестах следует использовать в качестве контроля носитель, не покрытый липидом. Это удваивает объем работы при скрининге супернатантов гибридом на связывание с липидными антигенами. Если антиген в липидном экстракте составляет только минорную фракцию, то при твердофазном РИА можно получить ложноотрицательный результат.

заказ воды с iPhone в Нижнем Новгороде

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.