каждую полоску очень важно выяснить вЛектин-активируе- мая система, однако, гораздо менее эффективна, так как лектин, кроме того, снимает и запрет на активацию и функционирование всех цитотоксических Т-клеток, присутствующих в культуре. Остается неясным, почему аллореактивные хелперы активируют в среднем только одну из пяти В-клеток. Это может определяться либо тем, что полученная эффективность клонирования все еще не достаточно высока, либо выборочной стимуляцией определенной подгруппы В-клеток. Тем не менее условия активации, коммитирование большинства активированных клеток к выработке IgG или IgA, а также результаты новейших экспериментов по фракционированию В-клеток указывают на то, что данная аллореактивная система обеспечивает количественно репрезентативную активацию предсуществующего пула В-клеток памяти, возникших в результате первичного иммунного ответа in vivo. Среду, содержащую ФРТК, готовят так, как описано у Шрейера и Тиса Schreier, Tees, 1980. Клетки селезенки крыс Lewis инкубируют в нормальной культуральной среде 5Х ХЮ6 клетокмл, содержащей 4 мкгмл Кон-А. Через 48 ч над- осадочную жидкость собирают, фильтруют и хранят при -20 С. Обычно готовят 4-5-литровые партии, используя клетки селезенки от 50 крыс. Надосадочную жидкость проверяют на содержание стимулирующей рост активности, используя ФРТК-зависнмую клеточную линию CTL-L16, полученную от д-ра Смита К. Smith, Dartmouth, и разбавляют в соответствии с титром ФРТК обычно 1 5 нормальной культуральной средой. Полученную среду, содержащую неочищенную надосадочную жидкость, назвали CS-средой. Частично очищенный ФРТК получают из культуральной среды для клеток селезенки крыс, в которой содержатся митоген и 0,025 БСА вместо сыворотки. После 48 ч инкубации клеток в такой среде ее собирают, белки осаждают сульфатом аммония при 80 насыщения, диализуют и фракционируют на сефадексе G-100 Schreier et al.1980. Во фракциях определяют активность титр ФРТК и объединяют наиболее активные из. Частично очищенный ФРТК добавляют в нормальную культуральную среду, обычно до конечной концентрации 5. В этом случае пролиферация клеток CTL-L16 была оптимальной.

Проведите отпуск вместе с лучшим отелем – «Альбертина»! Вы забудете про все гостевые дома Калининградской области и города прочно и навсегда.

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.