более удобно существует много еариантов жидкостьДругие варианты жидкостной хроматографии также основаны на различиях в равновесных распределениях разделяемых молекул между стационарной и подвижной фазами. В случаеобратнофазовой жидкостной хроматографии ОФХ стационарной фазой является твердый носитель с пришитой органической неполярной группой. Вещества связываются с носителем благодаря сродству к этим неполярным группам. Таким образом, здесь степень связывания фракционируемых веществ с носителем обусловлена их гидрофобными свойствами. Обычно пришивают линейные алкильные углеводородные цепи, хотя иногда используются и фенильные, и дифенильные группы. Длина алкильных цепей варьирует от 2 до 18 атомов углерода. При хроматогра- фировании небольших молекул органических веществ длина цепей пришитых групп оказывает существенное влияние на характер разделения, в то время как фракционирование белков от нее не зависит Pearson et al.1982. В качестве подвижной фазы используют полярный растворитель. Элюция при обратнофазовой хроматографии, как правило, не изократическая. Обычно для элюции используют линейный градиент, увеличивая содержание неполярного органического растворителя в подвижной фазе. В результате полярность растворителя снижается, что и приводит к изменению равновесного распределения молекул между стационарной и подвижной фазами. Этим обеспечиваются селективность элюции и разделение веществ в зависимости от их гидрофобных свойств. При ОФХ первыми элюируются менее гидрофобные вещества. При ионообменной хроматографии разделение достигается за счет связывания веществ с заряженными группами матрицы. Это связывание, благодаря которому вещество распределяется между подвижной и неподвижной фазами, может затем изменяться при изменении ионной силы или рН.

Юта-Компани — строим баню своими руками

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.