и вще один вариант использования очистки ксфОднако на 16-е сутки этот фон существенно выше вследствие увеличения числа клеток-предшественников, присутствующих в печени плодов этого возраста. Простейший путь преодоления указанной трудности состоит в использовании прикрепляющихся клеток, не способных генерировать иммуноглобулин-секретирующие колонии, которые могут быть обнаружены при данной постановке опыта. Например, прикрепляющиеся клетки мышей CBAN не образуют колоний, секретирующих антитела, и, следовательно, являются бесфоновым источником вспомогательных клеток. Альтернативный вариант состоит в использовании аллотип-специфических проявляющих реагентов, узнающих IgM-антитела мышей, несущих локус IgCHa-b-c, но не реагирующих с антителами, кодируемыми другими локусами Griitzmann, 1981. Хотя обычно мы работаем с гистосовместимыми линиями, следует отметить, что при использовании гистонесовместимых комбинаций мы пока не получали каких-либо необычных — положительных или отрицательных — результатов. Мы испробовали разнообразные ростовые факторы на их способность поддерживать дифференцировку колоний предшественников В-лимфоцитов, содержащих антитело-синтезирую- щие клетки. К настоящему времени нами обнаружено несколько таких факторов. К ним относятся вырабатываемый клетками WEHI-3 ростовой фактор для нескольких линий гемопоэти- ческих клеток мультилинеарный гемопоэтический ростовой фактор, или, сокращенно МГРФ Iscove et al.1982; вырабатываемый клетками L929 фактор, стимулирующий рост макро- фагальных колоний или колониестимулирующий фактор 1, сокращенно КСФ-1 Stanley, Heard, 1977; фактор, стимулирующий гранулоцитарные и макрофагальные колонии ГМ-КСФ, который был получен из культуральной среды, кондиционированной клетками легкого мышей Burgess et al.1977. Во всех случаях, однако, стимуляция этими факторами образования антитело-синтезирующих колоний оказалась зависимой от первоначальной плотности клеток в культуре Paige, 1984; Paige et al.1984. Линия регрессии, построенная в логарифмическом масштабе и оптимально удовлетворяющая данным экспериментов по титрованию, имеет наклон, равный 2-3. Это согласуется с гипотезой о том, что образование колоний в этих культурах лимитирует более чем один тип клеток или более чем один клеточный продукт. Поскольку все упомянутые ростовые факторы обладают способностью стимулировать рост колоний, содержащих макрофаги, возможно, что в этих условиях в дополнение к колониеобразующим пре-В-клеткам лимитирующими факторами являются макрофаги или их продукты. Соображения о важной роли макрофагов в дифференцировке В-клеток уже высказывались ранее Hoffman, 1980; Kincade et al.1981 a, b; Giri et al.1984.

Самые ржачные пошлые анекдоты со всего интернета

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.