тот и к клеткам добавляют по каплям 1982Тонкослойная хроматография ТСХ на покрытых слоем си- ликагеля пластинах является весьма эффективным методом анализа сложных смесей липидов. Проходящий через носитель элю- ент переносит отдельные липиды с разной скоростью в зависимости от их полярности, в результате чего липидные компоненты оказываются на разных расстояниях от места нанесения. Неполярные нейтральные липиды перемещаются почти с фронтом растворителя, в то время как полярные липиды задерживаются в соответствии с увеличением заряда и степени полярности. Соответствующие липидам фракции можно увидеть после обработки пластины парами йода или опрыскивания специальными окрашивающими реагентами. Для изучения гликолипидных антигенов чрезвычайно полезным оказался впервые описанный Маньяни и соавторами Mag- nani et al.1980 элегантный метод, представляющий собой комбинацию ТСХ и РИА. При использовании этого метода хро- матограмму сначала инкубируют с моноклональными антителами, а затем с меченными 1251 антителами против IgG мыши. Обладающие антигенной активностью липиды выявляют с помощью радиоавтографии отмытой и высушенной хроматограм- мы рис. 9-3. В сходном методе Towb, in et al.1984 липиды переносят блоттингом с хроматограммы на нитроцеллюлозный фильтр, который затем обрабатывают антителами таким же образом. С помощью этого метода можно выявлять антигены в количестве до нескольких нанограммов, т. е. его чувствительность на два порядка выше чувствительности, достигаемой при химическом детектировании с использованием паров иода и красящих реагентов. Не все виды покрытых силикагелем пластин для ТСХ одинаково пригодны для иммунологического выявления липидов.

денежный мешок

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.