Поскольку большинство белков, упоминаемых в литературе, имеют значения pl8 Righetti et al.1981, анионообменники применяют более широко, чем катионообменники Gupta et al.1983. Как и в других случаях, при разделении крупных белков критическим фактором является размер пор ионообменника. Показано, что анионообменники с размером пор до 4000 А применимы для хроматографии белков, имеющих мол. массу 200 000-400 000 Regnier, 1983. Раньше отдавали предпочтение слабым ионообменникам, но теперь показано, что сильный анионообменник Mono Q зарегистрированная торговая марка фирмы Pharmacia и сильный катионообменник Mono S зарегистрированная торговая марка фирмы Pharmacia обладают рядом преимуществ. Они характеризуются более высокой разрешающей способностью, более легко прогнозируемым временем задержки веществ и лучшим выходом белков, чем использовавшиеся ранее матрицы на основе силикагеля Kopaciewicz, Regnier, 1983. Эти новые анионообменники созданы на основе гидрофильной полиэфирной смолы Richey, 1982 имеют дополнительное преимущество они устойчивы в широком диапазоне рН 2-12. Силика- гельные матрицы используются только при рН 8, при больших значениях рН силикагель растворим. Хотя при обратнофазовой в обращенных фазах ВЖХ белков необходимо использование денатурирующих растворов с низким рН и органических растворителей в высоких концентрациях, она приобрела в последние годы большую популярность. Основные достижения в этой области рассмотрены в специальных обзорах Alvarez et al.1981; Regnier, 1983. При работе с некоторыми недавно созданными матрицами для ВЖХ на основе силикагеля могут использоваться мягкие условия элюции, приближающиеся к тем, которые применяются для разделений по гидрофобным свойствам на обычных носителях Kato et al.1983; Fausnaugh et al.1984; Gooding et al.

Партнерские программы для заработка

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.