для того чтобы избежать нестабильности существенно для

led прожекторы

Переваренные образцы охлаждаютв каждый флакон добавляют по 15 мл сцинтиллятора и образцы снова охлаждают. Soluene 350 при смешивании со сцинтиллятором дает очень высокий фоновый уровень счета. Фон исчезает по прошествии определенного времени и при охлаждении. Этот эффект зависит от качества толуола в сцинтилляторе. Обычно для снижения фона достаточно инкубации флаконов в течение 1 ч при 4С. Когда фон становится ниже 50 импмин, можно измерять образцы на сцинтилляционном счетчике. Обычное время счета- 1 минобразец; окна счетчика устанавливают для регистрации 3Н или 14С. В принципе описанный здесь метод может быть использован для любого поверхностного антигена и любых моноклональных антител. На практике применение метода лимитируется аффинностью антител и чистотой встречаемости антигена на поверхности клетки. В случае применения антител IgM, которые трудней получать в чистом виде, чем IgG, а также при работе с клетками-мишенями, содержащими большое количество Fc-рецепторов, например со спленоцитами, могут возникнуть серьезные проблемы, связанные с неспецифическим связыванием. Самые четкие результаты получают с лимфобластами, стимулированными Кон-А. При изучении клеток мышей нам удавалось получать хорошие результаты с моноклональными антителами против антигенов Н-2, la, TL, p2m, Thy-1, Ly-1 и Ly-2. Описанный метод был применен для детектирования новых антигенов на фибробластах, трансфецированных клонированными Я-2-генами табл. 12-2. Мы обычно используем этот метод для Н-2- и 1а-типирования стимулированных Кон-А спленоци- тов, которые также применяются как клетки-мишени для цито- токсических Т-клеток. Очень удобно, что эти клетки можно оставлять на холоду в течение ночи перед проведением теста связывания табл. 12-3. Для стандартного Н-2- и 1а-типирова- ния мышей-беккроссов мы хирургически удаляем два или четыре шейных лимфатических узла и готовим клеточную суспензию.

Звезды и планеты тут все о природе

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.