стандартные белковые образцы

Все недорогие гостиницы Екатеринбурга, с отзывами, ценами и фото, собраны на сайте 1eburg.ru. Здесь же можно забронировать номер совершенно бесплатно.

Поскольку удаление тритона Х-100 диализом — процесс весьма длительный, более предпочтительно его удаление с помощью сорбции на полистирольных гранулах SM2. Они представляют собой гидрофобные частицы, способные к сильной адсорбции молекул детергента Holloway, 1973. Смесь липидов и белков в растворе детергента инкубируют, встряхивая ее с гранулами SM2 до тех пор, пока не сформируются липосомы. К смеси, содержащей 1 мг липидов, 1 мг белков и 10 мг тритона Х-100 в объеме 1 мл, добавляют 0,25 мл буфера для реассоциации и 0,2 мл гранул SM2. Инкубируют смесь при постоянном встряхивании 3 ч при 20 С, а затем удаляют жидкую фазу и добавляют к ней новую порцию 0,2 мл гранул SM2. После еще одной инкубации со встряхиванием в течение 3 ч супернатант должен начать опалесцировать, что указывает на образование липосом. Если белки, выделенные на лентил-лектиновом или иммунном носителе, требуется реассоциировать с липидами после удаления детергента диализом, то необходимо заменить тритон Х-100 на детергент с малым размером мицелл, например на ок- тилглюкозид. Это легче всего сделать в тот момент, когда белки адсорбированы на аффинной колонке. Через колонку пропускают один объем буфера без тритона Х-100, содержащего 4,5 мгмл октилглюкозида. К липидно-детергентной пленке добавляют раствор белка и тщательно перемешивают смесь при комнатной температуре. Смесь переносят в диализный мешочек и диализуют против буфера для реассоциации в течение 18 ч с тремя сменами буфера. На образование липосом указывает появление в липидно-белко- вой смеси опалесценции. Е. Очистка липосомЛипосомы, полученные после удаления детергента из липид- но-белкового раствора, очищают с использованием центрифугирования в градиенте сахарозы Helenius et al.1977. При этом из препарата липосом удаляются растворимые и денатурированные белки. На градиент сахарозы 15-60 объем 4 мл в центрифужной пробирке для ротора SW50 Beckman наслаивают 1 мл липосомной суспензии.

Здесь книги по языкам программирования

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.