Инжектор высокого давления должен быть также удобным в работе. Накопленный в нашей лаборатории опыт позволяет заключить, что для разделения белков с помощью ВЖХ наиболее подходящим является инжектор с петлей на 2 мл. Инжектор позволяет вводить в петлю любой объем образца вплоть до 2 мл. При повороте клапана инжектора петля подсоединяется таким образом, что на колонку первой подается последняя введенная в петлю порция образца. Это сводит к минимуму размазывание полосы материала, что особенно важно для ГП-ВЖХ. Для разделения белков пригодны многие наполнители колонок, но лучше всего для этих целей использовать крупнопористые матрицы, для которых характерно низкое неспецифическое связывание белков. В состав большинства систем ВЖХ входят предварительные колонки, предохраняющие от порчи более крупные и дорогостоящие разделяющие колонки. Для предварительных колонок часто используют тот же наполнитель, что и для основных. В случае ОФ-ВЖХ разделения проводили и просто на одних предварительных колонках Bhown, Bennett, 1984. Для белков большинство детекторов регистрирует поглощение УФ-света или флуоресценцию. Имеются разнообразные ультрафиолетовые детекторы, работающие в сканирующем режиме, а также детекторы с изменяемой или фиксированной длиной волны. Коллектор фракций для ВЖХ должен работать достаточно быстро, чтобы успевать за высокой скоростью элюции; имеется много типов пригодных для этих целей коллекторов фракций. В нашей лаборатории методы ВЖХ используют для очистки изучения структуры и функции иммуноглобулинов. Ниже приведены детальные описания применяемых вариантов ВЖХ и примеры их использования. ГП-ВЖХ применяют для разделения легких и тяжелых цепей антител после восстановления и ал- килирования. Этот метод используют также для очистки фрагментов антител после их химического расщепления.

Снять сегодня дворец для cвадьбы — это не такая уж и сложность — были бы деньги и желание

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.