2-3 при скрининге космидных бибгиотекЕго чувствительность на два порядка выше чувствительности, достигаемой при химическом детектировании с использованием паров иода и красящих реагентов. Не все виды покрытых силикагелем пластин для ТСХ одинаково пригодны для иммунологического выявления липидов. Слой силикагеля должен быть достаточно прочно связан с подложкой и не должен сходить с неё при обработке пластины водными буферными растворами. Наилучшие результаты мы получили на алюминиевых пластинах для высокоэффективной тонкослойной хроматографии Merck, Darmstadt, ФРГ, покрытых силикагелем 60. Ймпрегнирование тонкослойной хроматограммы небольшим количеством полимера полиизобутилметакрилата увеличивает прочность слоя силикагеля Brockhaus et al.1981. Эта обработка придает силикагелю водоотталкивающие свойства и в целом приводит к снижению фона и повышению чувствительности при использовании многих, но не всех типов моноклональных антител. Пластину для ТСХ с алюминиевой подложкой разрезают ножницами на полоски длиной 10 см и различной шириной в зависимости от числа образцов 7 мм на каждый образец и по 15 мм на поля с каждой стороны. Линию нанесения образцов проводят в 15 мм от края пластины мягким карандашом и отмечают точку нанесения для каждого образца. Липиды растворяют в проявляющем растворе, образец 1 мкл набирают в микрошприц и наносят на пластину в виде тонкой полоски. Можно наносить образец на ту же стартовую линию повторно, но необходимо соблюдать осторожность, чтобы не повредить иглой слой силикагеля. После того как место нанесения высохнет, пластину помещают в стеклянный сосуд для ТСХ, в котором содержится 100 мл проявляющего раствора, заранее уравновешенного с газообразной фазой. Пластину вынимают до того, как растворитель достигнет ее верхнего края. Полностью сухую пластину погружают на 30 с в полиизобутилметакрилат, растворенный в гексане. Как уже отмечалось выше, эта обработка не является обязательной.

Удаленный Заработок в Интернете на дому без финансовых вложений

Оставить комментарий

Вы должны авторизоваться для отправки комментария.