Архив рубрики «Основное»


играть онлайн мини игры

После того как место нанесения высохнет, пластину помещают в стеклянный сосуд для ТСХ, в котором содержится 100 мл проявляющего раствора, заранее уравновешенного с газообразной фазой. Пластину вынимают до того, как растворитель достигнет ее верхнего края. Полностью сухую пластину погружают на 30 с в полиизобутилметакрилат, растворенный в гексане. Как уже отмечалось выше, эта обработка не является обязательной. Сухую пластину выдерживают в течение 30 мин при 4С в буфере Б. Пузырьки воздуха, прикрепившиеся к пластине, следует удалить концом пипетки. Пластину вынимают из буфера Б и тыльную сторону тщательно протирают. Затем ее кладут на кусок парафильма, чуть больший по площади, чем сама пластина, и помещают во влажную камеру. Надосадочную жидкость гибридом разводят в соотношении 1 1 буфером Б и осторожно наслаивают по каплям на хроматограмму 100 мкл на» 1 см2. Влажную камеру устанавливают строго горизонтально. После инкубации в течение 6 ч при 4С пластину промывают 6 раз по 1 мин охлажденным ЗФР на качалке для удаления избытка антител. Затем инкубацию повторяют в тех же условиях с меченными 1251-антителами 5-Ю6 импмин-мл против IgG мыши в буфере Б.


сервер в европе

Иерсиниозная инфекция имеет черты сходства с брюшным тифом. Следует отметить, что для брюшного тифа характерно более позднее появление сыпи, представляющей собой единичные нежные розеолы, появляющиеся на передней брюшной стенке на 8-10-й день болезни. Для брюшнотифозных больных характерна выраженная адинамия, общий фон кожи отличается значительной бледностью, язык обложен белым или грязно-серым налетом, он утолщен и по краям видны отпечатки зубов. Так же, как и при иерсиниозной инфекции, отмечается гепатоспленомегалия, но в гемограмме выявляются лейкопения, относительный лимфоцитоз, анэо- зинофилия. Диагноз подтверждается выделением культуры из крови, мочи, фекалий и положительными результатами серологических исследований РПГА. Нередко псевдотуберкулез иерсиниоз необходимо дифференцировать с энтеровирусной инфекцией. При энтерови- русной экзантеме сыпь обычно носит пятнистый характер, часто присутствуют катаральные явления, характерны выраженные миалгии, нередко развивается серозный менингит, который сопровождается упорной и длительной головной болью и рвотой. В клиническом анализе крови может быть лейкопения, лимфоцитоз. В остром периоде развития иерсиниозной инфекции ее иногда дифференцируют с геморрагической лихорадкой с почечным синдромом Г Л ПС. Для Г Л ПС свойственны кратковременность лихорадки, ухудшение состояния на фоне нормализации температуры, боль в поясничной области, развитие олигурии, гепатоспленомегалия и увеличение лимфатических узлов, изменения в анализе мочи с развитием иротеину- рии, изогипостенурии, микрогематурии, цилиндрурии, про- грессирование почечной недостаточности. Важное значение для дифференциального диагноза имеет тщательно собранный эпидемиологический анамнез сезонность, нахождение в эндемичном районе и т. д. В отдельных случаях проводится дифференциальный диагноз между иерсиниозом и ревматоидным артритом. При этом большое значение имеют частые ангины в анамнезе. Для ревматоидного полиартита характерна симметричность поражения крупных суставов, летучий характер артралгий в отличие от иерсиниозов. Одновременно может развиться кольцевидная эритема, характерны изменения в сердце от миокардита до панкардита, но обычно отсутствуют гепатоспленомегалия, экзантема, диарейный синдром, характерные для иерсиниозной инфекции. В сыворотке крови больных ревматизмом определяется высокий уровень антистрептолизина О. Наибольшую сложность представляет дифференциальная диагностика псевдотуберкулеза иерсиниоза Е. П. Шувалова, 1980, Н С.

Лечение деревьев

для полумения кагиброеочных кривых три илиРастворимые факторы, опосредующие В-клеточные реакции in vitro, впервые описаны в двух работах Dutton et al.1971; Schimpl, Wecker, 1972. Недавно благодаря открытию и определению свойств фактора роста Т-клеток Morgan et al.1976, который был потом назван интерлейкином-2 ИЛ-2, существенно расширилось представление о закономерностях роста Т-кле- ток in vitro. Эти исследования стимулировали работы по поиску сходных лимфокинов, действующих на клетки В-ряда. Показано, что активированные В-клетки отвечают на действие растворимых факторов, секретируемых в культур ал ьную жидкость растущими in vitro Т-хелперами или Кон-А-стимули- рованными спленоцитами крыс, увеличением включения тими- дина и ускорением созревания клеток с образованием бляшко- образующих клеток БОК Melchers et al.1980; Andersson et al.Andersson, Melchers, 1981. Позднее были получены данные о лимфокинах, избирательно поддерживающих рост В-клеточных популяций Howard et al.1982; Lernhardt et al.1982; Leanderson et al.1982; Yoshizaki et al.1983, а также о различных факторах, стимулирующих созревание до клеток, продуцирующих иммуноглобулины Isakson et al.1982; Paige et al.

Я не умею переустанавливать операционную систему, поэтому в таких случаях пользуюсь услугами по обслуживанию компьютеров.

Et al.2003, позволило идентифицировать регион, гомологичный Ы-локусу HPI Yersinia. Десять из jfo-генов у Y. pestis имеют гомологи в P. lumines- cens. Генетическая организация кластера из 5 генов от irp2 до уЫЕ консервативна у обоих видов, в то время как порядок и размещение других 5 генов различны. Идентичность аминокислотных последовательностей продуктов Y. pestis и P. lumi- nescens составляет от 26 до 55. Генетические маркеры островов патогенности, такие как Р4-подобные int, hef, asn tRNA, attB-L и attB-R, не были обнаружены у P. luminescens. Это говорит о том, что, как и HPI-подобный элемент у Y. pestis, ybt-локус не входит в состав острова патогенности у Р. luminescens. Однако, содержание GC. уЫ-подобного локу- са 48значительно выше, чем у ядерного генома 42. 8подтверждая, что этот локус был получен путем горизонтального переноса. Обнаружение HPI у патогенных Yersinia способствовало выделению подгруппы высокопатогенных штаммов. Более выраженная идентичность HPI генов Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis по сравнению с другими хромосомными генами и различная генетическая организация этих HPI свидетельствуют, что HPI был приобретен двумя видами независимо и горизонтально после их дивергенции от предка Yersinia около одного миллиона лет назад Achtman М. et al.1999. Однако из-за высокого консерватизма HPI генов у Y.

Здесь вам окажут помощь в it аутсорсинге. Специалисты infotech-k

Секрет популярности браслетов шамбала.

Достаточно эффективны в этих случаях меченые аффинно-очищенные гетероан- тисыворотки. Однако мы используем, как правило, сэндвич- метод. При этом первым реагентом служат крысиные монокло- нальные антитела против иммуноглобулинов мыши, а вторым, проявляющим — конъюгированные с р-галактозидазой мышиные моноклональные антитела против иммуноглобулинов крысы. Эта система имеет то преимущество, что для обнаружения всех типов секретируемых иммуноглобулинов требуются только одни меченые антитела. В контрольных экспериментах мы обнаружили, что способ переноса на НЦ выявляет приблизительно на 20 больше колоний, секретирующих антитела, чем соответствующий метод, основанный на определении зон гемолиза Sauter, Paige, 1985. 3. Оптимизация и контроль специфичности Для оптимизации методики обнаружения антител и обеспечения специфичности используемые реагенты титруют и проверяют, используя в качестве стандартов наборы миеломных белков. Это делают с помощью простого теста, в котором известное количество очищенного миеломного белка связывают с НЦ-фильтром. После связывания инактивации свободных участков связывания фильтры служат тест-панелью для меченых реагентов. В серии других контрольных опытов миелом- ные клетки выращивают в агаре в условиях, идентичных тем, которые используют для роста предшественников В-клеток. После того как колонии достигают должного размера от нескольких дней до 2 нед, агаровый гель удаляют и обрабатывают либо по методике, основанной на выявлении зон гемолиза, либо по способу переноса продуктов секреции на НЦ. Хотя нам удалось найти условия, обеспечивающие рост и дифференцировку предшественников В-клеток, мы пока еще не знаем, что именно в этих условиях является существенным.

Гримваген, актерские вагоны в аренду

гибриды для насыщения поверхностиПравда, белок А можно использовать только для некоторых классов антител, антитела против иммуноглобулинов не всегда могут применяться при работе с В-клетками. Если гибридомная линия, синтезирующая необходимые моноклональные антитела, отсутствует, то приходится использовать один из перечисленных выше методов мечения антител. Однако и в этом случае можно в дальнейшем предусмотреть биосинтетическое введение метки в антииммуноглобулиновые моноклональные антитела, поскольку их можно использовать вместо иодированных реагентов. В принципе можно использовать любую меченную радиоактивным изотопом аминокислоту, которая включается в белки с достаточной эффективностью. Мы, например, предпочитаем 3Н-лейцин. Лейцин является необходимой аминокислотой, в достаточной степени представленной в иммуноглобулинах. Кроме того, среды, не содержащие лейцина, имеются в продаже. Тритий стоит дешевле, чем 14С, и может быть получен с большей удельной активностью. Различие в периодах полураспада между этими изотопами в данном случае не имеет существенного значения, так как эти периоды превышают продолжительность обычного пребывания исследователей на академических должностях. 14С может иметь преимущества тогда, когда встречаются осложнения, связанные с тушением люминесценции. Если требуется очень высокая удельная активность, то применяют 35S-Me- тионин, однако при этом необходимо чаще получать и очищать меченые антитела использовать их в более короткие сроки. Приведенный здесь метод с применением 3Н-лейцина может быть использован при работе с любой меченой аминокислотой или смесью аминокислот. При этом нужна только культураль- ная среда, не содержащая соответствующей аминокислоты или аминокислот. Такие среды легко готовить, используя Select- Amine Kit Gibco. Из культуральных матрасов удаляют клетки гибридом в экспоненциальной фазе роста; при этом наиболее жизнеспособные клетки остаются прикрепленными к стенкам матрасов. Матрасы дополнительно промывают ГКН-буфером и новую порцию смытых клеток объединяют с клетками, полученными при первом удалении среды. К клеткам, оставшимся в матрасах, добавляют 4 мл среды для мечения, предварительно подогретой до 37С и насыщенной газовой смесью, состоящей из 7 Ог и 83 N2. Смытые с матрасов клетки центрифугируют, подсчитывают и однократно промывают в ГКН-буфере.

Лучшие валютные проститутки города на нашем сайте.

при -70 в качестве подвижной фазы пробиркиЕсли необходим более чистый препарат, то верхнюю фазу концентрируют до конечного объема 1 мл при 37 С в водяной бане с помощью потока азота. Патрон С18 для обратнофазовой хроматографии сначала промывают 2 мл смеси хлороформ — метанол 11 при небольшом давлении, создаваемом резиновой грушей или пастеровской пипеткой, а затем — последовательно 2 мл метанола и 2 мл воды. После этого через патрон медленно пропускают концентрированную верхнюю фазу и затем 2 мл воды и воздух. Липиды элюируют 1 мл смеси хлороформ — метанол 11 и элюат высушивают в потоке азота. Липидные антигены можно определять с помощью простого качественного теста с применением твердофазного РИА или иммуноферментного анализа ELISA в 96-луночных панелях для микротитрования. По аналогии с процедурами, используемыми при анализе адсорбированных на панелях белковых антигенов, липиды также можно сорбировать на поверхности лунок из обработанных ультразвуком водных суспензий. Однако более удобно вносить липиды в лунки панелей в метаноле или этаноле Brockhaus et al.1981; Kannagi et al.1983, а затем давать возможность растворителю испариться. Для этих целей можно использовать верхнюю фазу липидного экстракта, но не следует применять растворы в смеси хлороформ — метанол, так как хлороформ растворяет материал, из которого сделаны панели. Для насыщения поверхности одной лунки поливинилхлорид- ной панели достаточно 20 нг чистого гликолипидного или около 100 нг фосфолипидного антигена. Опыты с мечеными липидами показывают, что после серии инкубаций и отмывок с твердой фазой остается связанной только небольшая доля вносимого исходно в лунки липидного материала. Липиды, по-видимому, сорбируются на поверхности полимера за счет гидрофобных взаимодействий, так как их связывание весьма чувствительно к действию неионных детергентов, которые практически не влияют на связывание белков с поливинилхлоридом. Вследствие этого к антителам или отмывочным растворам нельзя добавлять детергенты, что обычно делают для снижения фона.

Народная медицина, нетрадиционная медицина лечение народными средствами от все болезней.

Продажа участков в Подмосковье: коттеджный поселок Новая Речица. Строящийся поселок не далеко от Москвы.

Исходный раствор содержит 0,5 мг антител на 1 мл и 50 мкл 0,05 М СгС13. Суспензию клеток инкубируют 1 ч при 30С несколько раз перемешивая и перед использованием промывают один раз в 0,9-ном NaCl и дважды в CP 700 g, 10 мин, 4С. Смесь для формирования зон гемолиза состоит из равных объемов 20-ной суспензии конъюгированных эритроцитов, кроличьей антисыворотки к р-цепям мыши, разбавленной в соотношении 1 20 CP и комплемента морской свинки Behringwerke A. G.абсорбированного бараньими эритроцитами и разбавленного в соотношении 1 4 СР. Для получения зон гемолиза панели центрифугируют 150g, 10 мин, 4С и культуральную среду стряхивают. Затем мультипипеткой Titertek в каждую лунку добавляют 50 мкл смеси, предназначенной для образования зон гемолиза. Содержимое 50 мкл пяти лунок один ряд отбирают мультипипеткой и разливают в стеклянные пробирки на 5 мл, содержащие по 250 мкл теплого агара 5-ный агар в CP при конечной концентрации ДЭАЭ-декстрана 0,05; водяная баня 46 С. Содержимое всех пяти пробирок быстро перемешивают на вортексе и заливают в пластиковые чашки Петри диаметром 10 см. На слой агара кладут круглые покровные стекла диаметр 22 мм; Assistent, Glaswarenfabrik К. Hecht, 8595, Швейцария и затем чашки инкубируют в увлажненном инкубаторе при 37 С. Зоны гемолиза подсчитывают 4-5 ч спустя. Популяция костномозговых клеток-предшественников, использованная в эксперименте, проиллюстрированном на рис. 14-1, содержала не более одной sIgM-секретирующей клетки на 50 000 клеток, а частота встречаемости клеток, чувствительных к ЛПС, в этой популяции была ниже Ю-4. Культивирование таких клеток-предшественников на прикрепившихся клетках костного мозга приводит к возникновению двух пиков образования функционально зрелых В-клеток рис.

Покупайте только лицензионные cd диски в нашем Интернет-магазине.

образцы тонкослойная хроматография

Автошкола «Форсаж»: обучение в автошколе здесь. Обучение вождению категории Б.

Одними из первых разделение стандартных белков с помощью ВЖХ провели Ренье и Ноэль Regnier, Noel, 1976 на носителях для эксклюзивной хроматографии и Мёнч и Де- нен Monch, Dehnen, 1978 на носителях для обратнофазовой ВЖХ ВЖХ в обращенных фазах. Однако после того, как Рубинштейн и др. Rubinstein et al.1979 впервые выделили 21 мкг активного интерферона из лейкоцитов человека с использованием четырех последовательных этапов ВЖХ, стало ясно, что малые количества биологически активных белков можно с успехом хроматографировать на имеющихся в продаже ВЖХ-носителях. ВЖХ использовали также для очистки других интерферонов Menge, Kula, 1984; Rinderknecht et al.1984. С 1979 г. носители для колонок были в значительной степени улучшены, что подробно обсуждается в обзоре Ренье Regnier, 1983. ВЖХ обеспечивает большую скорость разделения, воспроизводимость, чувствительность и является более универсальным приемом, чем традиционные хроматографические методы. В настоящее время с помощью ВЖХ можно проводить микроаналитические разделения на уровне пикомолей Stein, Udenfriend, 1984, аналитические разделения на уровне наномолей Alvarez et al.1981, а также полупрепаративное фракционирование В отечественной литературе ее также называют жидкостной хроматогра фией при высоком давлении ЖХВД. — Прим. ред. перев.

заказать шоколадный фонтан

Такие прикрепившиеся клетки можно собрать после интенсивного пипетирования, однако эту процедуру выдерживают только около 50 клеток. Обычно мы используем более мягкий способ отделения клеток от подложки. Он состоит в том, что после отсасывания среды к культуре добавляют холодную среду, не содержащую Са2 и Mgz. Через 1 мин большую часть этой среды отсасывают и еще через 5 мин клетки суспендируют в свежей порции культуральной среды. центрифугируют. Цель этого центрифугирования смеси родительских клеток двух типов в маленьком объеме среды состоит в том, чтобы получить осадок, в котором эти клетки хорошо перемешаны. Надосадочную жидкость полностью удаляют пастеровской пипеткой, а осадок помещают на несколько минут в водяную баню при 37 С. В пробирку при осторожном ее покачивании по каплям прибавляют предварительно нагретый 37С 40-ный раствор полиэтиленгликоля ПЭГ 4000. По каплям в течение 1 мин вносят 1 мл культуральной среды без сыворотки, 5 мл предварительно нагретой 37 С CS-среды, содержащей гипоксантин Ю-4 М, тимидин 1,6-105 М, ан- тимикоплазменные антибиотики линкомицин 1 мгмл и тило- зин 100 мкгмл, и 43 мл той же культуральной среды. Полученную смесь помещают в водяную баню при 37 С. Через 45 мин гибридные клетки разливают в лунки пяти 96-луночных плоскодонных панелей по 3,6-104 клеток включая мертвые в 100 мкл на лунку. На одну панель приходится 2-106 контрольных негибридизованных клеток. Через двое суток после гибридизации в каждую лунку добавляют по 100 мкл селективной среды. Селективной средой служит CS-среда, содержащая гипоксантин Ю-4 М, аминоп- терин 4-Ю-7 М, тимидин 1,6-Ю-5 М и уабаин 1-Ю-3 М.

Искал в интернете туры в сингапур хабаровск, а нашел, вы не поверите, туры в сингапур и нашел. Яндекс — мечты сбываются.